SacI

SacI ist ein Restriktionsenzym aus dem Bakterium Streptomyces achromogenes.

Endonuklease SacI
Masse/Länge Primärstruktur 358 Aminosäuren, 39.965 Da
Bezeichner
Gen-Name(n) SacI (Rebase)
Externe IDs
Enzymklassifikation
EC, Kategorie 3.1.21.4, Restriktionsenzym
Reaktionsart Hydrolyse
Substrat DNA
Produkte Zweisträngige DNA-Fragmente mit terminalen 5'-Phosphatgruppen
Vorkommen
Übergeordnetes Taxon Streptomyces achromogenes

Eigenschaften

SacI ist eine Endonuklease (Typ II, Subtyp P), die DNA an einer palindromischen DNA-Erkennungsequenz schneidet. Durch den versetzten Schnitt der DNA durch SacI entsteht ein sticky end mit einem 4-Basen-Überhang und je einer Phosphatgruppe an beiden 5'-Enden der doppelsträngigen DNA-Produkte. SacI wird weder durch eine DAM-Methylierung, noch durch eine DCM- oder eine CpG-Methylierung gehemmt. Nach einer Restriktion von DNA in vitro kann SacI durch 20-minütiges Erhitzen auf 65 °C denaturiert und somit inaktiviert werden. Meistens wird SacI als rekombinantes Protein in E.coli hergestellt.

ErkennungssequenzRestriktionsschnitt
5'-GAGCTC-3'
3'-CTCGAG-5'
 
5'-GAGCT       C-3'
3'-C       TCGAG-5'

Anwendungen

SacI wird für Restriktionsverdaue im Rahmen von Klonierungen oder Restriktionsanalysen[1] verwendet.

Einzelnachweise
  1. Farouk Shakib: The Human IgG Subclasses. Elsevier, 2016, ISBN 978-1-483-28720-1, S. 65–67.
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