اندماج الحويصلة

يجب أن تكون الحويصلة على بعد بضعة نانومترات من الغشاء المستهدف حتى تبدأ عملية الاندماج في الحويصلة المشبكية. يسمح هذا التقارب لغشاء الخلية والحويصلة بتبادل الدهون التي تتوسطها بروتينات معينة تزيل الماء الذي يأتي بين الارتباط المكون. بمجرد أن تصبح الحويصلة في موضعها، يجب أن تنتظر حتى يدخل + Ca2 الخلية عن طريق انتشار جهد الفعل إلى الغشاء قبل المشبكي.[5] يرتبط +Ca2 ببروتينات معينة، أحدها هو سينابتوتاجمين، ذلك في الخلايا العصبية التي تؤدي إلى الاندماج الكامل للحويصلة مع الغشاء المستهدف.[6]

يُعتقد أيضاً أن بروتينات سنير تساعد في التوسط في الغشاء المستهدف للحويصلة.[7]

الآلات الجزيئية التي تقود الإخراج الخلوي في إطلاق الوسيط العصبي. يتكون تجميع سنير الأساسي من أربعة حلزونيات α تساهم بها سينابتوبريفين وسينتاكسين وسناب-25، ويعمل سينابتوتاجمين كمستشعر للكالسيوم وينظم بشكل وثيق ضغط سنير[8].

يُحتمل أن يؤدي تجميع بروتينات سنير في التركيبات "العابرة" إلى ربط الطبقات الثنائية الدهنية المتعارضة للأغشية التي تنتمي إلى الخلية والحبيبات الإفرازية، مما يجعلها قريبة وتحفز اندماجها. يؤدي تدفق الكالسيوم إلى الخلية إلى اكتمال تفاعل التجميع، والذي يكتمل بوساطة التفاعل بين مستشعر الكالسيوم المفترض، سينابتوتاجمين، مع الدهون الغشائية و/أو تركيب سنير المجمع جزئياً.

تتضمن إحدى الفرضيات جزيء كومبلكسن داخل مجمع سنير وتفاعله مع جزيء سينابتوتاجمين.[9] المعروفة باسم فرضية "المشبك"، وجود المركب عادةً ما يمنع اندماج الحويصلة في غشاء الخلية. ومع ذلك، فإن ربط أيونات الكالسيوم ب سينابتوتاجمين يؤدي إلى إطلاق المركب أو تعطيله، بحيث تكون الحويصلة حرة في الاندماج.[10]

وفقاً لفرضية "السحاب/الزمام المغلق"، يبدأ التجميع المعقد عند الأجزاء الطرفية N من أنماط سنير ويتقدم نحو طرف C التي تثبت البروتينات المتفاعلة في الأغشية. يستمر تكوين مركب سنير "العابر" من خلال مركب وسيط يتكون من سناب-25 وسينتاكسين-1، والذي يستوعب لاحقاً سينابتوبريفين-2 (تشارك الأنماط المتماثلة سينتاكسين وسينابتوبريفين المقتبسة في إطلاق الوسيط العصبي العصبوي).

استناداً إلى استقرار مجمع سيس سنيرالناتج، فقد افتُرِضَ أن الطاقة المنبعثة أثناء عملية التجميع تعمل كوسيلة للتغلب على قوى التنافر بين الأغشية. هناك العديد من النماذج التي تقترح تفسيراً لخطوة لاحقة - تشكيل مسام الساق والانصهار، لكن الطبيعة الدقيقة لهذه العمليات لا تزال موضع نقاش. اثنان من أبرز النماذج في تكوين مسام الانصهار هما نظريات مسام الانصهار المبطنة بالدهون والبروتين.[11]

في نظرية المسام المبطنة بالدهون، ينحني كلا الغشاءين تجاه بعضهما البعض لتشكيل مسام الاندماج المبكرة. عندما يُحضر الغشاءين إلى مسافة "حرجة"، تُدخل مجموعات رؤوس الدهون من أحد الأغشية في الآخر، مما يخلق الأساس لمسام الاندماج.

أحد النماذج الممكنة لتشكيل مسام الاندماج هو نظرية المسام المبطنة بالدهون. في هذا النموذج، بمجرد أن تكون الأغشية قريبة بما فيه الكفاية عبر آلية "السحاب/الزمام المغلق" لمركب سنير، يحدث اندماج الغشاء تلقائياً. لقد ثبت أنه عندما يُحضر الغشاءين ضمن مسافة حرجة، فمن الممكن أن تندمج مجموعات رؤوس الدهون المحبة للماء لغشاء واحد مع الغشاء المقابل.[12] في نموذج مسام الاندماج المبطنة بالدهون، يعمل مركب سنير كسقالة، يسحب الغشاء، مما يتسبب في تجعد كلا الغشاءين حتى يصلا إلى مسافة الاندماج الحرجة. عندما يبدأ الغشاءان في الاندماج،يُنتج ساق مبطن بالدهون، يتوسع شعاعياً للخارج مع استمرار الاندماج.

حيث أن المسام المبطنة بالدهون ممكنة وتحقق جميع الخصائص نفسها التي لوحظت في تكوين المسام المبكر، لا توجد بيانات كافية لإثبات أنها الطريقة الوحيدة للتكوين.[13] لا توجد حالياً آلية مقترحة للتنظيم بين الخلايا لتذبذب المسام المبطنة بالدهون، وستواجه وقتاً أكثر صعوبة في إنتاج تأثيرات مثل "القبلة والجري" عند مقارنتها بنظيراتها المبطنة بالبروتين. تعتمد فعالية المسام المبطنة بالدهون أيضاً بشكل كبير على تكوين كلا الغشاءين، ويمكن أن يختلف نجاحها أو فشلها بشكل كبير مع التغيرات في المرونة والصلابة.[13]

نموذج آخر محتمل لتشكيل مسام الاندماج هو نظرية المسام المبطنة بالبروتين. في هذا النموذج، بعد تنشيط سينابتوتاجمين بواسطة الكالسيوم، تتجمع العديد من مجمعات سنير معاً لتشكيل بنية حلقية، حيث يشكل سينابتوبريفين المسام في غشاء الحويصلة ويشكل سينتاكسين المسام في غشاء الخلية.[14] مع توسع المسام الأولية، فإنها تشتمل على دهون من كلا الطبقتين، مما يؤدي في النهاية إلى اندماج كامل بين الغشاءين. مركب سنير له دور أكثر نشاطاً في نظرية المسام المبطنة بالبروتين. نظراً لأن المسام تتكون في البداية بالكامل من بروتينات سنير، فإن المسام قادرة بسهولة على الخضوع للتنظيم بين الخلايا، مما يجعل التذبذب وآليات "القبلة والهروب" سهلة الحدوث.[9]

تلبي المسام المبطنة بالبروتين تماماً جميع المتطلبات المرصودة لمسام الاندماج المبكر، وبينما تدعم بعض البيانات هذه النظرية،[14] لا توجد بيانات كافية لاعتمادها كطريقة أساسية للاندماج. تتطلب المسام المبطنة بالبروتين خمس نسخ على الأقل من مركب سنير بينما لوحظ الاندماج مع عدد قليل من نسختين.[14]

تظل وظيفة معقد سنير دون تغيير إلى حد كبير، في كلتا النظريتين، ومجمع سنير بأكمله ضروري لبدء الاندماج. ومع ذلك، فقد ثبت أن سينتاكسين في المختبر في حد ذاته يكفي لدفع الاندماج التلقائي المستقل للكالسيوم للحويصلات المشبكية التي تحتوي على سنير-v.[15] هذا يشير إلى أن سينابتوتاجمين الإخراج الخلوي العصبي المعتمد على +Ca2 هو منظم مزدوج، في غياب أيونات +Ca2 لتثبيط ديناميكيات سنير، بينما في وجود أيونات +Ca2 لتكون بمثابة ناهض في عملية اندماج الغشاء.

اقترح بعض علماء الكيمياء العصبية أن الحويصلات المشبكية في بعض الأحيان قد لا تندمج تماماً مع الأغشية قبل المشبكية في إطلاق الناقل العصبي في الشق المشبكي. يكمن الجدل في ما إذا كان الإدخال الخلوي يحدث دائماً في إصلاح الحويصلة بعد إطلاق الناقل العصبي أم لا. آلية أخرى مقترحة لإطلاق محتويات الحويصلة في السائل خارج الخلية تسمى الاندماج بالقبلة والجري.

توجد بعض الدلائل على أن الحويصلات قد تشكل فقط مسام صغيرة في الغشاء قبل المشبكي مما يسمح بإطلاق المحتويات عن طريق الانتشار القياسي لفترة قصيرة قبل التراجع مرة أخرى إلى الخلية قبل المشبكية. قد تكون هذه الآلية طريقة للتغلب على الإدخال الخلوي بوساطة الكلثرين. يقترح أيضاً أن الحويصلة لا تحتاج إلى العودة إلى الإندوزوم لإعادة ملئها، على الرغم من أنه ليس مفهوماً تماماً من خلال الآلية التي ستعيد تعبئتها. هذا لا يستبعد اندماج الحويصلة الكاملة، ولكنه ينص فقط على أن كلتا الآليتين قد تعملان في الشقوق المشبكية.

ثبت أن "القبلة والجري" تحدث في خلايا الغدد الصماء، على الرغم من أنها لم تشاهد مباشرة في الفجوات المشبكية.[16]